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PCR實(shí)驗(yàn)室核酸檢測(cè)步驟

瀏覽:時(shí)間: 2020-05-22 17:14:01

摘要:PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室,是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng),能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其精確度高達(dá)納米級(jí)別。下面來(lái)看看核酸采樣的步

PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室,是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng),能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其精確度高達(dá)納米級(jí)別。下面來(lái)看看核酸采樣的步驟:

第一步:采樣

    首先由疾控中心醫(yī)務(wù)人員對(duì)檢測(cè)患者進(jìn)行采樣,在進(jìn)行認(rèn)真核對(duì)后,帶入到PCR實(shí)驗(yàn)室。

    第二步:接收樣本

采集的樣本會(huì)在專用傳遞窗口,由專人負(fù)責(zé)接受和消毒,核對(duì)確認(rèn)無(wú)誤后,將樣本帶入PCR實(shí)驗(yàn)室,進(jìn)行滅活處理。

第三步:樣本提取

    實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入核酸提取室需進(jìn)行三級(jí)防護(hù)(防護(hù)衣、N95口罩、正壓式呼吸防護(hù)系統(tǒng))才能保障實(shí)驗(yàn)安全進(jìn)行,操作進(jìn)行中必須時(shí)刻謹(jǐn)記生物安全,注意樣本安全,避免溢撒和污染。

第四步:讀取結(jié)果

最后一步通過(guò)熒光定量?jī)xRT-PCR,將標(biāo)本中的特定RNA序列逆轉(zhuǎn)錄進(jìn)行擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)30次以上擴(kuò)增后,病毒基因片段達(dá)到一定數(shù)量即可進(jìn)行可視性檢測(cè)。 

據(jù)區(qū)疾控中心相關(guān)負(fù)責(zé)人介紹,從樣本水浴滅活到樣本核酸提取、試劑體系配制、加提取所得核酸樣本、上實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀,到最后讀取接樣到結(jié)果,整個(gè)流程大約需要花費(fèi)5個(gè)小時(shí)左右的時(shí)間。而且在實(shí)驗(yàn)期間,疾控中心相關(guān)檢驗(yàn)人員中途不能離開自己工作區(qū)域,必須每時(shí)每刻繃緊自己的神經(jīng),因?yàn)樗麄兪窃诤筒《敬蚪坏馈?o:p>

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